Monitoreo epidemiológico para Brucella abortus en fincas doble propósito del Municipio Machiques de Perijá, Venezuela: parte II validez y seguridad de las pruebas anillo de la leche y rosa de bengala / Epidemiologic surveillance system for Brucella abortus in dual purpose farms from Machiques de Perijá county, Venezuela: part II validity and accuracy of ring test and rose bengal test

Se evalúa la capacidad operativa de las pruebas diagnósticas: anillo de la leche (PAL), inmunoensayo enzimático indirecto (ELISA-i), rosa de bengala (RB) y ELISA competitivo (ELISA-c), utilizadas tras 5 años (2003-2007) de vigilancia epidemiológica para brucelosis bovina (Brucella abortus) en el municipio Machiques de Perijá, partiendo de la revalorización de un conjunto de muestras de leche y suero probados positivos y negativos. La garantía de diagnóstico previamente positivo fue alcanzada a través de evidencias epidemiológicas y positividad comprobada en suero sanguíneo al ensayo con antígeno buferado en placa y confirmación mediante fluorescencia polarizada (FP); sólo se consideraron negativos probados, los sueros y leches globales provenientes de animales negativos a FP que a lo largo del estudio no presentaron antecedentes serológicos alguno. Los resultados en leche muestran superioridad de ELISA-i versus PAL, en sensibilidad, 98,55 contra 56,52 por ciento; especificidad 99,41 y 98,82 por ciento; predicción positiva 98,58 y 95,12 por ciento; predicción negativa 99,49 y 84,84 por ciento; y cocientes de probabilidad. El nivel de concordancia entre los resultados y el verdadero estatus de las muestras fue también preferente para ELISA-i, 97,8 contra 55,3 por ciento. Las evidencias sobre sueros probados dejan en duda la contribución de RB en el diagnóstico, control y erradicación de la enfermedad en el área de estudio, al demostrarse valores medios de validez (169,92 versus 197,21) y seguridad (171,74 versus 197,02), además de bajos coeficientes de verosimilitud entre sus resultados. ELISA-c, en cambio, mantuvo excelente capacidad diagnóstica.

The performance of the following diagnostic tests: Milk Ring Test (MRT), Indirect Enzyme-linked Immunosorbent Assay (iELISA), Rose Bengal Test (RBT) and Competitive ELISA (cELISA) used for 5 years (2003-2007) in the epidemiological surveillance system for bovine brucellosis (Brucella abortus) in Machiques de Perijá County was evaluated. For this purpose, milk and sera samples previously assessed through the abovementioned tests were reassessed to define their true condition (true positive or true negative). Samples were considered as true positive through epidemiological findings and a positive result in Buffered Plate Antigen Test, which was confirmed through Fluorescence Polarization Assay (FPA); samples were considered as true negative only when they were taken from FPA-negative animals that did not seroconvert during the study. Results from tests in milk showed a higher performance of iELISA versus MRT, in sensibility: 98.55 and 56.52 percent; in specificity: 99.41 and 98.82 percent; in positive predictive value: 98.58 and 95.12 percent; in negative predictive value: 99.49 and 84.84 percent; and in coefficients of probability, respectively. The level of agreement between test and true status of samples was higher in iELISA: 97.8 versus 55.3 percent. Results from true positive and true negative samples warrant a reappreciation of the contribution of RBT in diagnostics, control and eradication of brucellosis in the studied area, taking into account its medium values of validity (169.92 versus 197.21) and accuracy (171.74 versus 197.02), as well as its low coefficients of probability. By contrast, cELISA showed an excellent diagnostic performance.

Monitoreo epidemiológico para brucella abortus en fincas doble propósito del municipio machiques de perijá, Venezuela: Prevalencia, riesgo y efecto de un programa de control / Epidemiologic Surveillance System of Brucella abortus in Dual Purpose Farms of Machiques de Perijá County, Venezuela: Prevalence, Risk Factors and Control Program

Se evalúa la evolución durante 5 años (2003-2007) de la brucelosis bovina (Brucella abortus) en el municipio Machiques de Perijá. El estudio se realizó identificando en leche, tres veces por año, fincas reactivas a la prueba de anillo (PAL) y positivas a un ensayo inmuno enzimático indirecto (ELISA-i). Paralelamente, fueron analizadas muestras de sangre de la población bovina adulta, procedente de las explotaciones problemas, para identificar animales positivos a Rosa de Bengala (RB) y confirmados, por un ensayo inmuno enzimático competitivo (ELISA-c). Adicionalmente, se analizan los alcances de la enfermedad a nivel de un matadero municipal. Los resultados del monitoreo epidemiológico permiten evidenciar disminución progresiva en la ocurrencia de la problemática. Así, en el 2003, se detectó la existencia de 32,3% (209/648) de fincas reactivas a la PAL y 62,9% (404/583) positivas a ELISA-i, y se constató, la presencia y beneficio de animales positivos a RB/ELISA-c sin la identificación pertinente, lo cual repercute sobre la salud de los trabajadores. Para el 2007, se identifican 11,4% de rebaños reactivos a la PAL y 27,2% a ELISA-i; con una positividad de 0,38% (158/41630) de animales infectados según criterio diagnóstico seriado de RB/ELISA-c, aunque se demuestra sesgo importante en esa medición. Además, se identificaron 178 explotaciones (27,0%) sin evidencia de la enfermedad, que pudieran optar por una clasificación o estatus de libres de brucelosis. En el futuro próximo se hace necesario extender el monitoreo hacia fincas proveedoras de queseras artesanales, evaluar las contribuciones individuales de PAL y ELISA-i, como ensayos primarios en la vigilancia de la problemática, implementar providencias coercitivas de control y explorar nuevas técnicas diagnósticas para la identificación rápida de animales infectados. Estas medidas contribuirán, en mediano plazo, a la erradicación de esta enfermedad en esa región del país.

Bovine brucellosis (Brucella abortus) behavior in Machiques of Perijá County was evaluated for 5 years (2003-2007). The survey was undertaken through Ring Test and indirect ELISA (iELISA) performed on milk samples collected 3 times per year from farms located in Machiques de Perijá County. Moreover, serum samples from the adult bovine population of those farms were analyzed to detect reactors to Rose Bengal Test, which were subsequently confirmed by competitive ELISA (cELISA). Brucellosis prevalence was determined at a county slaughterhouse as well. Epidemiological surveillance results suggest a progressive decrease in brucellosis prevalence. In 2003, 32.3% (209/648) of farms were Ring Test reactors and 62.9% (404/583) were iELISA reactors; also, RBT/cELISA positive animals were slaughtered without having been branded adequately according to the law, which negatively affects slaughterhouse workers’ health. In 2007, 11.4% of herds were Ring Test reactors and 27.2% were iELISA reactors; 0.38% (158/41630) of animals were infected according to RBT/cELISA results, there is an important bias in this serial methodology though. Furthermore, 178 farms (27.0%) did not have reactors to the methods used in this survey, which could be candidates to a brucellosis-free status. In the near future, it would be necessary to extend the epidemiological surveillance for brucellosis to farms supplying traditional cheese making factories; to replace Ring Test for iELISA as the main test for milk; to implement compulsory control measures and to explore newer diagnostic tools for rapid identification of infected animals. These measures will contribute, in a short term, to brucellosis eradication in this region of Venezuela.